巰基

巰基

巰的字和音均由氫硫二字拼合而成。帶有巰基的化合物最常見的是半胱氨酸HOOC-CH(NH2)-CH₂-SH、谷胱甘肽G-SH以及含半胱氨酸殘基的各種蛋白質

  • 中文名稱
    巰基
  • 類型
    化學
  • 最常見
    半胱氨酸
  • 結構式
    —SH

基本介紹

巰基又稱氫硫基。是由一個硫原子和一個氫原子相連組成的一價原子團,結構式為:—SH

巰基是硫醇(R—SH)、硫酚(Ph—SH)、硫代羧酸(硫羥羧酸,或俗稱硫趕羧酸)分子中的官能團。

結構介紹

由氫和硫兩種原子組成的一價原子團。也叫氫硫基。 巰的字和音均由氫硫二字拼合而成。帶有巰基的化合物最常見的是半胱氨酸HOOC-CH(NH2)-CH2-SH、谷胱甘肽G-SH以及含半胱氨酸殘基的各種蛋白質。兩個半胱氨酸的兩個巰基可以脫氫氧化為胱氨酸而在分子中形成-S-S-結構,-S-S-稱為二硫鍵(二硫橋),二硫鍵是巰基的氧化形式,二硫鍵可加氫再還原為巰基。谷胱甘肽、巰基蛋白及巰基酶的活性基團是巰基,通過巰基參與反應。

巰基

檢測方法

1. RP-HPLC法測定巰基含量

採用色譜柱Kromasil-C18 (250×4.6mm, 5μm),流動相A(0.1%TFA)和流動相B(甲醇)梯度洗脫:流動相B 40%~80%,0~10min,然後80% B保持5min,流速0.8mL/min,檢測波長327nm,得到NTB標準曲線y=3.67059x+0.14123,回收率101.9%,RSD=l.17%,從而建立了一種高靈敏度巰基檢測方法。

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2. 採用分子熒光光譜法作為反應條件,用反相高效液相色譜梯度洗脫法測定巰基

用OPA、丹酰氯、茚三酮與半胱氨酸反應,測其可見紫外吸收光譜及熒光光譜;在不同PH、溫度、反應時間條件下,用OPA與半胱氨酸反應測其熒光度;分別吸收0.1mmol/L半胱氨酸溶液0、20、40、60、80、100 μl,各加入10 μlH2O2,室溫下反應30min,然後加熱蒸幹,殘渣用200μl OPA衍生液,定容至5 ml,4 min時測其熒光光譜。取pH8.4的硼酸緩沖溶液 5μl,混合10次;加入OPA衍生液2μl,混合進樣走HPLC。梯度條件:洗脫液B所佔比例0min為0,17min線性增加至60%,17.5min線性增加至100%,20min洗脫結束。激發波長為340nm,熒光檢測波長為450nm。

3.柱前衍生高效液相色譜-紫外檢測法

以tris(2-carboxylethyl) – phosphine (TCEP)為還原劑,7–fluorbenzo–2–oxa –1,3– diazole– 4-sulfonate(SBD-F)為衍生劑,N-乙酰半胱氨酸為內標,C8色譜柱分離,流動相為甲醇 -磷酸鹽緩沖液(pH =3. 0),梯度洗脫 ,385 nm處檢測。線性範圍為8. 3~1042. 6 μmol/L,最低檢測限為 0. 42μmol/L,日內精密度為 1. 67%~1. 86%,日間精密度為 2. 08%~3. 06 %,平均回收率為 98. 1%~103. 2 %。

4. 電化學脫附與熒光技術聯用

將樣品固定在烷基硫醇自組裝膜修飾的金電極表面 ,通過熒光試劑馬來酰亞胺與遊離巰基反應原位標記 GSH,恆電位條件下脫附電極表面吸附物 ,檢測脫附物在 0.1 mol·L.KOH溶液中的熒光強度。

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