吡羅紅

吡羅紅

吡羅紅G,英文名為Xanthylium,3,6-bis(dimethylamino)-, chloride,分子式是C17H19ClN2O。又名派洛寧G,吡羅紅使RNA呈現紅色,常用于檢測細胞中RNA的分布,常與甲基綠一起混用即為甲基綠-派洛寧(methyl green-pyronin),鹼性染料,它分別能與細胞內的DNA、RNA結合呈現不同顏色。

  • 中文名稱
    吡羅紅
  • 化學式
    C17H19ClN2O
  • CAS登錄號
    92-32-0
  • 別    稱
    派洛寧
  • 危險性描述
    R68:
  • 分子量
    302.80
  • 應    用
    觀察細胞DNA、RNA分布
  • 英文名
    Xanthylium,3,6-bis(dimethylamino)-, chloride
  • EINECS登錄號
    202-147-8
  • 水溶性
    溶于水
  • 安全性描述
    少量安全

​概述

基本信息

吡羅紅G(pǐ luó hóng)

英文名:Xanthylium,3,6-bis(dimethylamino)-, chloride (1:1)

別名:Ammonium,[6-(dimethylamino)-3H-xanthen-3-ylidene]dimethyl-, chloride (8CI);

Methanaminium, N-[6-(dimethylamino)-3H-xanthen-3-ylidene]-N-methyl-, chloride;

Pyronine G (6CI);

Xanthylium, 3,6-bis(dimethylamino)-, chloride (9CI);

3,6-Bis(dimethylamino)xanthylium chloride;

C.I. 45005;

Pyronin G;

Pyronin GS;

Pyronin Y;

Pyronin Yellow;

Pyronine;

Pyronine GS;

Pyronine GY;

Pyronine Y;

Schultz no. 853

分子式:C17H19ClN2O

相對分子質量:302.80

CAS號:92-32-0

EINECS號:202-147-8

危險類別碼:R68:可能有不可挽回的作用的危險

染色原理

即吡羅紅G,又名派洛寧G,吡羅紅使RNA呈現紅色,常用于檢測細胞中RNA的分布,常與甲基綠一起混用即為甲基綠-派洛寧(methyl green-pyronin),鹼性染料,它分別能與細胞內的DNA、RNA結合呈現不同顏色。當甲基綠與派洛寧作為混合染料時,甲基綠與染色質中DNA選擇性結合顯示綠色或藍色;派洛寧與核仁、細胞質中的RNA選擇性結合顯示紅色。其原因可能是兩種染料的混合染液中有競爭作用,同時兩種核酸分子都是多聚體,而其聚合程度有所不同。甲基綠易與聚合程度高的DNA結合呈現綠色。而派洛寧則與聚合程度較低的RNA結合呈現紅色(但解聚的DNA也能和派洛寧結合呈現紅色)。即RNA對派洛寧親和力大,被染成紅色,而DNA對甲基綠親和力大,被染成綠色。

使用配製方法

關于吡羅紅和甲基綠分裝粉的使用方法

試劑及配製方法

試劑

質量分數為0.9%的NaCl溶液,乙酸鈉乙酸,蒸餾水,吡羅紅甲基綠混裝粉。如果化學試劑商店沒有吡羅紅甲基綠混裝粉,可以分別購買甲基綠和吡羅紅G,然後按A液的第二種方法配製。

配製步驟

①染色劑A液的兩種配製方法

第一種方法:取吡羅紅甲基綠粉1 g,加入到100 mL蒸餾水中溶解,然後用濾紙過濾,將濾液放入棕色瓶中備用。

第二種方法:取甲基綠2 g溶于98 mL蒸餾水中,取吡羅紅G 5 g溶于95 mL蒸餾水中。取6 mL甲基綠溶液和2 mL吡羅紅溶液加入到16 mL蒸餾水中,即為A液,放入棕色瓶中備用。(註意:用于核酸染色的是吡羅紅G,請不要錯買吡羅紅B。)

②染色劑B液的配製方法 B液是一種緩沖液,由乙酸鈉和乙酸混合而成。先取乙酸鈉16.4 g,用蒸餾水溶解至1 000 mL備用;再取乙酸12 mL,用蒸餾水稀釋至1 000 mL備用。取配好的乙酸鈉溶液30 mL和稀釋的乙酸20 mL,加蒸餾水50 mL,配成pH為4.8的B液(緩沖液)。

③染色劑的配製 染色劑是由A液、B液混合配製而成的。取A液20 mL和B液80 mL混合,就是實驗中所用的吡羅紅甲基綠染色劑。應該註意的是該試劑應現配現用。

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