上皮細胞

上皮細胞

上皮細胞是位于皮膚或腔道表層的細胞。上皮細胞根據器官的不同而有所指不同:尿常規的上皮細胞,是衰亡、脫落的皮細胞,沒有很特定的指向意義。

  • 中文名稱
    上皮細胞
  • 位于
    皮膚或腔道表層
  • 差異
    根據器官的不同而有所指不同
  • 形狀
    扁平,柱狀
  • 主要分布
    鼻腔、鼻咽、器官、肺、胃、腸
  • 作用
    保護和吸收

基本簡介

​尿常規的上皮細胞,是衰亡、脫落的皮細胞。沒有很特定的指向意義。非SLE的人,包括正常人,有了什麽相關的炎症,脫落下去,給尿常規見到了,也是有的。上皮細胞根據器官的不同而有所指不同。

上皮細胞

主要特征

上皮細胞是位于皮膚或腔道表層的細胞.

上皮細胞的形狀有扁平,柱狀等等.

皮膚外層的上皮細胞普遍角質化,有保護和吸收的作用.

腔道中的上皮細胞多分化,有分泌,排瀉和吸收等功能.

相關分類

上皮組織分為被覆上皮、腺上皮和感覺上皮三類,而通常所說的上皮就是指被覆上皮。

上皮細胞按細胞層數可分為單層和復層兩類,按形狀可分為柱狀和鱗狀。

柱狀上皮細胞:主要分布于鼻腔、鼻咽、器官、肺、胃、腸、子宮頸、子宮內膜輸卵管等部位。

鱗狀上皮細胞:被覆于全身皮膚、口腔、喉部、鼻咽的一部分、食道、陰道的全部以及子宮頸。鱗狀上皮細胞分為基底層細胞、中層細胞和表層細胞。    

上皮細胞培養

表皮細胞培養

1.取材:取外科植皮或手術殘餘皮膚小塊,以角化層薄者為佳,早產流產兒皮膚更好,切成0.5~1平方釐米小塊。

2.EDTA處理:先置入0.02%EDTA中室溫置5分鍾。

3.冷消化:換入0.25%胰蛋白酶中,置4℃過夜。

4.分離:取出皮膚,用血管鉗或鑷子把表皮與真皮層分開。

5.溫消化:取出表皮單獨處理,用剪刀剪成更小的塊後,置入新的0.25%胰蛋白酶中,37℃再消化30~60分鍾。

6.用吸管輕輕反復吹打,使成細胞懸液。

7.培養液:通過80目不銹鋼紗網濾過後,低速離心,吸上清,直接加入Eagle液和20%小牛血清,製成細胞懸液,接種入碟皿中,CO2溫箱培養

乳腺組織培養

直接培養法:(適于培養含纖維少的軟組織)

1.在含有少量培養液或Hanks液的容器中,用鋒利刀片將組織反復切割成碎塊。

2.把組織碎塊連同液體註入離心管中,再補加少許培養液,用吸管吹打片刻,置試管架3~5分鍾。吸除上層液可排除非乳腺細胞部分。重復2~3次。

3.末次處理結束後,向沉降管中再補加培養液,用吸管稍吹打,使沉降物重懸。不待細胞團塊下降立即通過3~4層無菌紗布濾入另管中。

4.調整好適宜密度,接種入培養瓶中培養。

膠原酶消化法:(適于處理含纖維多的較硬組織)

其過程與培養其它組織相同。

胃上皮細胞培養

1.取材:取胃潰瘍或胃癌手術切除胃標本遠端非病變區粘膜少許。

2.清洗:用含慶大酶素(400微克/毫升)和二性酶素(2微克/毫升的Hanks)液漂洗後,用鈍器剝離下粘膜,剪成1mm3大小。

3.消化:在I型膠原酶和透明質酸酶中,于37℃中消化80分鍾。

4.離心:收集細胞懸液,800轉/分離心後,Hanks液漂洗兩次。

5.接種:末次離心後加入含有1%~2%胎牛血清的完全培養基,接種入不同孔數的培養板中,接種量依不同實驗目的而定。

肝細胞培養

初代組織塊培養:取新鮮肝髒,先剝除被膜和血管等纖維成分,用刀或剪刀把肝髒剪成1mm3左右的小塊,採用帖壁培養法。

內皮細胞培養

1.取產後的新鮮臍帶。如不立即培養可以儲存于4℃中,但不宜超過12小時。無菌剪取長10~15釐米一段。其它如胚胎和幼體動物的大血管,亦可用于培養。

2.先用三通註射器吸溫PBS液註入臍帶的靜脈中,洗除殘血,註入口處宜用線繩結扎,以防液體返流。

3.用血管鉗夾緊臍帶一端,從另端向臍靜脈中徐徐註入最終濃度為0.1%的膠原酶,待末端出現液體後結扎之,令充滿血管,註入口亦應結扎,以防液體返流,消化3~10分鍾。

4.吸出含有內皮細胞的消化液,註入離心管中,為獲取更多細胞,可再註入溫PBS沖洗2~3次徹底清除幹凈殘餘細胞,一並註入離心管中離心。

5.吸除上清,加1640培養液,製成細胞懸液,接種入瓶皿中培養,順利時2~3天內細胞即可長成單層。

毛細血管內皮細胞培養

腫瘤條件培養基製備:

1.取C3H小鼠的S-180實體肉瘤組織。

2.胰蛋白酶消化,Dulbecco改良Eagle氏培養液15ml(含10%小牛血清),接種到T-75 Falcon產培養瓶中培養。

3.在細胞生長接近完全匯合時,收集培養液製成條件培養基;再用含10%小牛血清的新培養液後,也每隔兩天收集一次,可獲得多量條件培養

4.4000轉/分離心後,再通過0.22μm微孔濾膜濾過,-20℃凍存備用(臨用前融解)。

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